EXTRACCIÓN DE ADN OBJETIVOS Lograr la extracción de ADN de una muestra vegetal. FUNDAMENTO TEÓRICO Los ácidos nucleicos están siempre asociados con proteínas, de allí que una vez hecha la ruptura de las células se proceda a la desproteinización. Esta...
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EXTRACCIÓN DE ADN OBJETIVOS Lograr la extracción de ADN de una muestra vegetal. FUNDAMENTO TEÓRICO Los ácidos nucleicos están siempre asociados con proteínas, de allí que una vez hecha la ruptura de las células se proceda a la desproteinización. Esta puede realizarse agitando suavemente la mezcla ácido nucleico-proteina con una solución de fenol y/o una mezcla de cloroformo-alcohol isoamílico a fin de precipitar las proteinas, la que se remueven por centrifugación. Las proteinas pueden también disociarse de los ácidos nucleicos con detergentes, cloruro de guanidina o altas concentraciones salinas, pueden también degradarse mediante proetasas, tal como la pronasa. Se obtiene así una mezcla de RNA y DNA que puede aislarse precipitando con etanol. El RNA se recupera de estos precipitados tratándolo con DNAsa pancreática para eliminar el DNA, y el DNA puede liberarse del RNA tratando el precipitado con RNasa. El DNA y RNA pueden también separase por ultracentrifugaciones. En todo este pr
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